纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle Tracking Analysis, NTA）检测细胞外囊泡粒径

目的

利用NTA检测细胞外囊泡的直径和浓度

仪器

Particle Metrix’ ZetaView

材料

细胞外囊泡样品、超纯水、100 nm标准粒径珠、PBS

实验方法

1. 开机：先开机器，再开软件，软件绿灯亮提示连接成功；根据软件提示，首先注入超纯水约5 ml，点击“OK”；

   
   

   

2. 校准：根据软件提示注入约3 ml的100 nm标准粒径珠（使用浓度为1:250,000），打开温控，设置相应参数，运行校准程序；

   
   

   

3. 清洗：注入约5 ml超纯水，观察各个位点的颗粒数（No. of Detected Particles），若颗粒数小于10表示清洗干净；

   

4. 加样：先注入约3 ml PBS（稀释样品的介质是什么就用什么），再将稀释后的待测样品注入样品池（加样体积不少于2.5 ml），观察各个位点的颗粒（No. of Detected Particles），若颗粒值在50 ~ 200之间（提示域显示绿色）则表示浓度合适，可继续测量，否则需重新调整稀释倍数；

   

5. 设置参数：设置测量参数、稀释倍数、选择数据保存路径、更改文件名称、选择样品对应的SOP以及温度等，确认无误后点击“Run”开始测量；

   

6. 关机：所有样品测量结束后，注入至少20 ml超纯水冲洗样品池，观察无黏附颗粒后注入三管空气排空样品池，关闭温控按钮后先关闭软件，再关闭机器；若清洗后可见样品池内被颗粒黏附，应在仪器关闭后拆下样品池进行清洗；

7. 报告解读：报告中主要包含的信息有粒径、浓度、稀释倍数和原始浓度等。