细胞外囊泡的CFSE荧光标记实验

目的

利用有机染料琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记细胞外囊泡，使其具有荧光成像特性

仪器

恒温箱、超速离心仪

材料

细胞外囊泡样品、CFSE、PBS

实验方法

1. 取含1 µg 细胞外囊泡的PBS悬液，PBS补充体积至200 µl；

2. 加入1 µg/ml的CFSE染料，充分混匀；

3. 37 ℃，避光反应15～30 min；

4. 120,000 g 4℃超速离心70 min，去除多余染料，沉淀用PBS重悬。
   

注意事项

利用膜的选择渗透性进行标记并不具备特异性，对各种样本来源的细胞外囊泡均具备标记作用，也因此面临着各种有机大分子物质的干扰。此外，当亲脂性材料用于标记细胞外囊泡时，已被摄入的标记探针可能被重新释放。而利用转运蛋白进行标记时，其标记效率受到特定转运蛋白表达的影响，可能导致细胞外囊泡间的不均一标记。