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用于提取细胞外囊泡的常见液体样本的初步分离
目的
对用于提取细胞外囊泡的液体样本进行初步分离,去除细胞、细胞碎片以及聚合物和凋亡小体等杂质
仪器
离心机
材料
液体样本
实验方法
细胞培养上清
500 × g,5 min,去除细胞,保留上清液;
3,000 × g,20 min,离心2次,去除细胞碎片和粒径较大的EVs,保留上清液;
初离后细胞培养上清的保存:4 ℃(7天以内),-20 ℃(1月以内),-80 ℃(长期储存)
血液
血液样本需在室温下及时处理(低温会影响血细胞释放EVs);
1,550 × g,15 min,室温,离心2次,弃下层血细胞,保留上清液;
将离心获得的上清液进行分装,-80 ℃长期保存。
唾液
收集唾液于50 ml离心管中,如不能及时预处理,可在4 ℃临时保存;
2,600 × g,4 ℃,离心两次,15 min,弃沉淀;
将离心获得的上清液进行分装,-80 ℃长期保存。